淋巴瘤
是主要起源于淋巴细胞的一类恶性肿瘤。临床表现为淋巴结大，肝脾大，同时可以出现发热，消瘦，盗汗等全身症状。目前，淋巴瘤诊断，病理及免疫组化仍旧是金标准，但流式细胞学，荧光原位杂交技术对于淋巴瘤等诊断及预后判断也有非常重要的作用。随着二代测序技术的发展，越来越多的淋巴瘤病人可以检测到有临床意义的基因突变。下面，简单介绍一下NGS在淋巴瘤中的应用价值。
1●诊断分型●
众所周知，淋巴瘤的明确诊断，病理及免疫组化仍旧是金标准，但某些淋巴瘤，基因突变检测可能对淋巴瘤的诊断起非常重要的作用。譬如，毛细胞白血病（HCL）。HCL临床表现为全血细胞减少，巨脾；骨髓涂片肿瘤细胞呈毛刺样，抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性；骨髓活检免疫组化AnnexinA1特征性阳性；流式CD25，CD11c及CD特征性阳性；基因突变可检测到特征性的BRAFVE突变。TiacciE等报告了48例HCL，均检测到BRAF基因突变，而例其他类型淋巴瘤，均没有检测到BRAF基因突变（图一）。
图一（点击放大）
对于HCL-v，约48%的病人可以检测到MAP2K1基因突变，而在HCL及SMZL及SDRPSBCL中均罕见。另外，在SMZL中，约20-40%病人可以检测到KLF2基因突变，35%病人可以检测到NK-κB通路相关基因突变，10-25%可以检测到NOTCH2基因突变（图二）。
图二（点击放大）
淋巴浆细胞淋巴瘤/华氏巨球蛋白血症病人当中，约95-97%病人可以检测到MYD88基因突变，30-40%可以检测到CXCR4基因突变。但需要注意的是，MYD88基因突变并不是LPL/WM所特征性的，边缘区淋巴瘤，慢性淋巴细胞白血病，弥漫大B细胞淋巴瘤，IgM型MGUS均可以检测到该基因突变（图三）。
图三（点击放大）
在血管免疫母细胞淋巴瘤（AITL）中，约70.8%的AITL患者检测到RHOA基因突变，而在PTCL-NOS中，只有17.2%检测到该基因突变；但在B细胞恶性肿瘤及髓系肿瘤中未见该突变，所以RHOA可作为AITL的相对比较特异性分子学标记物（图四）。
图四（点击放大）2●预后评估●
弥漫大B细胞淋巴瘤可以根据病理类型分为GCB及非GCB型，根据c-MYC，BCL2及BCL6这三个FISH来诊断是否为双打击或者三打击淋巴瘤从而评估预后。RolandSchmitz等报道根据BCL2，BCL6重排及MYD88，CD79b，NOCTH1，NOCTH2，EZH2基因突变结果，分为BN2型（BCL6易位和Notch2基因突变）及EZB型（EZH2基因突变和Bcl2易位），这两型是预后较好的，而MCD型（MYD88LP突变和CD79B突变）及N1型（NOTCH1突变）是疗效不佳的（图五）。还有文献报道，在DLBCL里，SOCS1基因突变提示预后较好，而CERBBP，EP及ATM是提示预后不良的（图六）。
图五（点击放大）图六（点击放大）
对于慢性淋巴细胞白血病（CLL）；我们根据流式CD49d、CD38及ZAP70表达情况，IGHV高频突变状态，CEP11、TP53、+12、13q14这几个FISH及染色体核型来评估预后（图七）。现在也有文献报道，对于CLL病人，也应该做基因突变检测，包括TP53、ATM，NOTCH1及SF3B1这几个基因，都是提示预后不良的，而且，TP53基因突变和17p-有很强的相关性，这种状态是预后最差的（图八）。
图七（点击放大）
图八（点击放大）3●用药指导●
淋巴浆细胞淋巴瘤目前已经是伊布替尼适应症之一了；但我们在应用伊布替尼治疗LPL/WM之前，一定需要做基因突变检测，因为不同的基因突变状态决定了伊布替尼的疗效。如果MYD88没有突变，伊布替尼几乎是无效的；如果MYD88和CXCR4同时发生突变，伊布替尼有效但效果不是最好；如果只有MYD88突变而CXCR4没有突变，伊布替尼效果是最好的。
慢性淋巴细胞白血病目前伊布替尼已经是其一线治疗药物。但如果BTK基因（CS突变）或下游PLCG2基因发生突变，会影响伊布替尼与布鲁顿酪氨酸激酶（Bruton’styrosinekinase，BTK）的结合而影响疗效或不能抑制B细胞受体下游的磷脂酶C-γ2（PLC-γ2）磷酸而发生耐药。
弥漫大B细胞淋巴瘤，当存在单独的MYD88突变时，对伊布替尼是耐药的。然而，当MYD88突变伴有CD79A或CD79B突变时，则对伊布替尼是敏感的（图九）。
图九（点击放大）
总之，随着二代测序技术的发展，其在淋巴瘤中的应用也是越来越普及，也让临床医生越来越接近淋巴瘤的真相，从而指导诊断，危险度分层及治疗。我们建议，淋巴瘤的病人，都应该做淋巴瘤相关基因突变检测，如成熟B细胞淋巴瘤相关基因突变检测及成熟T/NK细胞淋巴瘤相关基因突变检测。具体基因列表见（图十）。
图十（点击放大）
参考文献
NEnglJMed;:-15.
Blood.Jul2;(1):61–68.
JClinOncol.May1;35(13):–.
JClinOncol.Mar20;35(9):-
JHematolOncol.Mar17;10(1):70
NEnglJMed;:-15.
NEnglJMed.Apr12;(15):-
NatGenet.;46(2):-.
CancerRes;78:-
JClinOncol.Mar20;35(9):–.
Tips
您好，感谢
